Mejorando las prestaciones del microscopio óptico (3ra parte)

Resolución

Una de las formas de mejorar la resolución de un microscopio es elegir la iluminación adecuada.

La resolución es lo que nos permite ver dos puntos cercanos en una imagen por separado y no en una misma mancha, por ejemplo vamos en la ruta y vemos venir un automóvil a lo lejos con sus luces encendidas, al principio solo vemos una luz, a medida que se acerca llega un punto que distinguimos ambos faros, ese es el límite de resolución de nuestra vista en esas condiciones. Con el microscopio ocurre lo mismo, hay tres factores que intervienen en la resolución de un microscopio, la calidad del objetivo es una, la refracción de la muestra que se mejora notablemente empleando aceite de inmersión y la longitud de onda de la luz  de iluminación, cuanto mas corta sea mayor será la resolución, sabemos que en el espectro visible, el rojo es la onda mas larga y el violeta la mas corta, por tanto si iluminamos con una lámpara rica en rojos, la resolución será mas pobre que si iluminamos con una luz azul.

Como ilustración he conseguido los espectros de la luz solar, la luz blanca de led y la luz halógena

 

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Imagen tomada de:

http://www.hondask.es/foro/showthread.php?2404-xenon-rosa/page2 

Como puede apreciarse la luz de Led tiene una buena componente de luz azul, no así la luz de halógeno, la que además, tiene un consumo considerable y una buena porción de infrarrojos que aumentan la temperatura, en verano se hace notar esta particularidad

La reforma de mi microscopio LOMO, este microscopio es muy antiguo tiene mas de 30 años y además tiene una buena campaña de uso, originalmente traía una lámpara de 25W que se conectaba directamente a 220v sin transformador, lo que a mi gusto lo hacía peligroso (electrocución) y la iluminación era de tono amarillento, traía un concentrador hecho con una lente convergente. 

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Se puede ver a simple vista el amarillo de la luz

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Con una linterna de leds, para el trabajo utilicé una igual que esta, pero de color azul

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En aluminio tornee una pieza que encaja justo en la base del microscopio

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En la parte superior encaja la linterna a la que le he cortado una parte

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Acá puede verse la luz bien blanca.

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El pobre microscopio esta bastante castigado, lleva 30 años ininterrumpidos de trabajo

La fuente, para no estar alimentando con pilas, construí una sencilla fuente que suministra 3v a 2 A regulados

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El diagrama de la fuente es básicamente el de este página, el tansformador que usé es de 6v 2A. Y el transistor final en lugar del 2n3055 usé otro que tenía.

http://www.proyectopic.com.ar/circuitos_e/fuente/Fuentereg.htm

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No hay que pensar que este cambio en la iluminación va a producir un cambio sustancial en la calidad, sin embargo si puedo asegurar que hay mejor nitidez que con la luz original.

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Mejorando las prestaciones del microscopio óptico (2da parte)

 

Iluminando desde arriba

Tomando la idea de un participante del foro de cientificosaficionados, el amigo joliva68 he construido un anillo con cuatro leds de alto brillo blanco, obteniendo baste buen resultado para observación de insectos y ácaros, solo he podido usarlo con la lente panorámica de 10X

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Imagen de un bebé pulgón

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Para mejorar la profundidad siempre se pueden tomar varias fotos y con algún software hacer un apilamiento

Florescencia

Con un sencillo dispositivo se puede ver fluorescencia en muestras

Siempre tuve la idea de iluminar con luz UV, hoy en día es muy fácil conseguir LED cuya longitud de onda anda por los 395 nm, se pueden comprar por ebay por minedas, estos leds tienen una buena componente en visible alrededor de los 415 nm.

Siguiendo con la misma idea del dispositivo anterior construí un anillo con ocho leds de este tipo, creo que la iluminación sería mas conveniente desde abajo pero no estoy seguro si esa luz pueda dañar la vista, también se podría usar con campo oscuro y de esa forma se evitaría la incidencia directa sobre los ojos.

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Para mejorar la intensidad de luz usé un espejo en láminas que obtuve cuando desarmé el display de un celular para sacar los plásticos polarizados, ese espejo colocado debajo la muestra aumenta notablemente la luminosidad, de cualquier forma siempre es conveniente apagar las luces del recinto donde se hace la observación.

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Se ve mi cámara Canon A570 reflejada

Para poder ver algo necesitaremos pigmentos fluorescentes, se pueden comprar o bien obtener de los marcadores flúor que son bien económicos, se extrae del interior del marcador un filtro que tiene la tinta que necesitamos, para extraerla le largamos desde el extremo superior con una pipeta unos 10 cm3 de agua destilada o solución fisiológica estéril, en la foto puede verse el líquido obtenido.

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Para preparar la muestra, por ejemplo de agua descompuesta donde hay muchos microorganismos, se ponen unas gotas de agua y la misma cantidad del liquido fluorescente, se deja aproximadamente una hora en contacto y luego el tubo se completa con agua y se centrifuga, se vierte el sobrenadante y se vuelve a lavar con agua, otra ves se vuelca el sobrenadante y con el sedimento se hace la observación entre porta y cubre

Se verán muchas bacterias que se tiñen fuertemente, algunas algas que absorben el colorante y microorganismos que también lo hacen.

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Yo tengo muy poca tecnología para las imágenes, en vivo se ven muchas bacterias y microorganismos

Este video del que se ve muy poco ya que solo he podido usar la lente de menos aumento muestra uno de estos microorganismos con vivos movimientos