Biodigestor experimental con botellas PET

Atendiendo a que son muchas las visitas a mi blog buscando información sobre biodigestión (el 15% del total) y muchos me hacen preguntas sobre posibles usos de materiales biológicos que no son conocidos en mi zona o no han sido probados, como excrementos de cuy o de llamas, he armado un BD didáctico donde se puedan hacer pruebas ya sea cambiando la alimentación del mismo o también las condiciones de temperatura y otros factores.

Se utilizan para este proyecto envases PET (Polietileno Tereftalato) son esas botellas de gaseosas, jugo, soda o agua no retornables.

La maqueta es funcional es decir genera metano o biogas y tiene dos partes, el biodigestor propiamente dicho que esta construido con un bidón de 5 litros de agua mineral y la parte del gasómetro que son dos envases, uno de 5 litros y otro de 2

Construcción del BD

El bidón de 5 litros debe estar en perfecto estado sin rajaduras ni perdidas, se practican 2 perforaciones en el mismo, una arriba y otra a un costado como muestra la figura

IMG_4442 [800x600]

Se utilizan para la boca de entrada y la de salida caños de PVC de 0.5 pulgada, el caño largo abajo tiene un corte en chanfle, por el se ingresara el “alimento”, llega hasta el fondo, el caño de salida donde se obtendrá el liquido digerido que se usa como abono esta hecho con dos codos y unos trozos de caño,  para unir y dejar estanco el recipiente, usé una pistola de soldar plástico, y arriba de eso con silicona (Silastic 732 rtv) es fundamental que no tenga perdidas, como en mi modelo había algunas perdidas usé silicona para sellar todo

IMG_4443 [800x600]

Se ve el tubo de entrada

IMG_4444 [800x600]

El tubo de salida, se hace de esta forma para que quede con un sello hidráulico que no permita que escape el gas, igual que el sifón de la pileta de la cocina o el inodoro

IMG_4448 [800x600]

Además del tubo por donde saldrá el gas he agregado otro tubito por donde pasa un alambre que servirá para agitar el contenido,  el alambre deberá llegar hasta el fondo del bioreactor para que mueva el sedimento

IMG_4451 [800x600]

Como trabaja el BD? Sistema de vasos comunicantes

El biodigestor trabaja siempre lleno en este modelo, cuanto mas volumen tenga mayor producción de biogas, hice este video demostrativo para que se entienda claramente como funciona, la física del BD,  en este caso llené con agua.

 

El gasómetro

Este modelo tiene un gasómetro separado del BD, unido a él por medio de una manguera, usaremos para estos fines una vía de las que se usan para pasar suero a las personas y para el gasómetro un PET de 5 litros como el del BD y otro de 2.25l

IMG_4446 [800x600]

La vía de suero y los dos PET, el de 5 litros ya esta cortado

IMG_4452 [800x600]

Acá puede verse el PET grande lleno de agua y el mas chico dentro del otro, le hice algunas marcas para luego cuando comience a generar gas ver cuanto produce a diario, para que se mantenga en su sitio le agregue dos guías a los costados y unos trozos de tergopor  en la parte del pico de la botella donde van las tubuladuras un anillo de hierro (la parte central de un rodamiento) para que haga mas presión.

IMG_4454 [800x600]

Esta foto muestra el dispositivo armado  y lleno de agua para verificar la estanqueidad del mismo.

Como se carga el BD por primera vez

Para llenar el BD por primera vez conviene ponerle materia orgánica mas o menos el 30%  del volumen total y además un inoculo es decir algo que contenga bastantes bacterias de las que nos interesan, las anaerobias, estas se encuentran en las heces de porcinos vacunos y equinos, pero conviene buscar en el desagüe de algún criadero o tambo, donde el barro es casi negro y se ven burbujas que salen a la superficie, con unos 250 gr de este barro (para este BD de 5 litros), es muy importante este inoculo, de él va a depender el tiempo para que el BD este operativo, de hecho el mejor inoculo sería conseguir el barro de un biodigestor que este funcionando, el resto de la primera carga pueden ser residuos orgánicos o heces de animales.

IMG_4613 [800x600]

Este fue el inoculo que agregue al BD, lo recomiendo especialmente ya que en muy pocas horas comenzó a generar metano, se trata de rumen, los vacunos tienen varios estómagos, en realidad varios compartimentos donde va pasando el alimento, una vez come el animal lo manda a al 1er estomago, durante un tiempo está ahí y luego lo regurgita nuevamente a la boca y el animal hace el rumeado, mastica nuevamente ese contenido del primer estómago y lo envía a otro compartimento, en este hay bacterias , hongos y otros microorganismos que trabajan en anaerobiosis, este es el contenido que nos interesa, si se llegan a algún lugar donde faenan animales van a conseguir este material.  Como se ve en la imagen parecen heces de vaca, no tiene prácticamente olor y es muy rico en bacterias anaerobias, de hecho en 24Hs que puse este inoculo  comenzó a generar.

IMG_4456 [800x600]

Ya esta cargado, con ese rumen y sorgo, el sorgo es muy buen productor de biogas, unos 30 o 40 grs bien molido para empezar estará bien.

Hecho esto no le agregaremos mas material orgánico hasta que empiece a producir el gas, conviene ir removiendo el contenido con el agitador que hicimos con el alambre, cada tanto iremos controlando el pH del liquido, que debe estar entre 6,5 y 7,5 una vez empieza a producir. El primer día medí el pH del contenido y estaba en 7,36, si no se dispone de un instrumento puede hacerse con unas cintas.

IMG_4622 [800x600]

Midiendo el pH a los 3 días del cargado del BD, esta un poco bajo, según dijimos el pH óptimo es de 6,5 a 7,5 sin embargo en esta etapa de la digestión que es fermentativa el medio es mas ácido, entre 5,5 y 6,5 así es que dejaremos correr el tiempo he iremos midiendo. A los pocos días agregue agua con cal para alcalinizar porque el pH se había bajado a menos de 5

Como esperar no es mi fuerte, le he pedido a Dios paciencia pero ya!! ya!!! como dice un amigo, he puesto al BD en una estufa de cultivo ya descripta en este blog

IMG_4614 [800x600]

La he puesto a una temperatura de 30° (este termostato electrónico tiene un +/- 2°C).  He puesto para homogeneizar la temperatura dentro del recinto un pequeño ventilador de PC, que esta soplando sobre las resistencias, el transformador que se ve es para alimentar ese fan

IMG_4615 [800x600]

Un pequeño video de la llama de metano que se obtuvo a la semana de cargar el BD, la llama es bastante tenue por lo que hubo que filmar de noche y la calidad no es buena

 

Como se calcula la cantidad de mezcla que debe agregarse  una vez  que empieza a producir

Para este cálculo tendremos en cuenta la siguiente tabla

Temperatura ambiente en °C 10 15 20 25 30 35
Tiempo de digestión 90 60 45 32 30 25

Datos tomados del libro “El camino de la Biodigestión” del ingeniero Groppelli  que recomiendo enfáticamente

Si estamos con un promedio de temperatura de unos 22° podemos extrapolar y considerar que el tiempo de digestión serán unos 40 días

Entonces:

5 litros  que es el volumen total del BD/40 días= 0,125 litros

Todos los días vamos a agregar 125 cc de la mezcla

Como se calcula la preparación de la mezcla

Siempre la mezcla tendrá un 10% de sólidos totales.

Para saber cuantos sólidos tiene determinado residuo orgánico se hace lo siguiente, se pesan unos 100 gr del residuo fresco y luego se lo pone en el horno de la cocina al máximo una hora (es de lindo esto… ja ja) , se vuelve a pesar y luego se deja otro rato y se vuelve a pesar, cuando ya el peso no varíe podremos sacar el porcentaje de sólidos totales de ese residuo, por ejemplo si son heces  frescas de vaca veremos que de los 100 gr solo quedarán unos 20 gr, el %  de sólidos será entonces el 20.

Como la mezcla debe tener un 10% de sólidos, si alimentamos con heces de vaca para 125 cc de mezcla necesitaremos 12.5 gr de sólidos

Si  20 de sólidos están en 100 gr los 12.5 estarán en  12.5×100/20= 62,5 gr de material fresco

Se pesan los 62.5 gr de heces frescas y se agrega agua hasta 125 cc

Esto se hace solo la primera vez, luego se toma la medida en un recipiente que contiene los 62,5 gr y hasta donde tenemos que agregar agua, no hay que ser súper estricto en el peso si va un poco mas o un poco menos no hay problemas

Otro ejemplo:

Si alimentamos con sorgo, que tiene mas o menos un 98% de sólidos, el cálculo es igual

12,5×100/98= 12,75gr

Pesamos los 12,75 gr y agregamos agua hasta 125 cc

De esta forma podemos hacer los cálculos con cualquier material, lo feo es calentar la caca en el horno 🙂

Resumiendo: La cantidad de mescla por día depende de la temperatura ambiente, a mas temperatura mas rápido es el proceso de digestión, si tarda 30 días, el volumen del BD se divide por 30 y eso nos da el volumen que agregamos cada día.

La mezcla tiene siempre un 10% de sólidos.

Tabla de porcentaje de sólidos aproximada en distintos “combustibles” para el biodigestor

Tipo de residuo % de Sólidos
Estiércol vacuno 18
Estiércol porcino 18
Desechos de huerta 11
Residuos de comida 20
Sorgo 98
Estiércol de aves 45

Otra tablita que esta en el libro antes mencionado, es para que no tengan que cocinar el popo en el horno y saber de antemano que porcentaje de sólidos tienen algunos de los materiales orgánicos.

Espero les haya gustado y les sea de utilidad

Un saludo

César

Anuncios

Avispa cazadora de arañas Crytocheilus comparatus

Esta temeraria avispa se expone en la guarida de la araña, cuyo tamaño es casi el doble que ella y se las ingenia para clavarle su aguijón, inyectándole un veneno que deja paralizada a la araña, luego la acarrea hasta su cueva donde le deposita sus huevos, la araña sigue viva, siendo de alimento a la larva que se desarrolla.

El video fue tomado esta tarde en mi casa, lamentablemente no pude filmar la pelea, pero si pude captar el acarreo de la gladiadora un espectáculo que pocas veces se puede ver. Disculpas por el sonido del vídeo.

avispa3

avispa43

Mejorando las prestaciones del microscopio óptico (3ra parte)

Resolución

Una de las formas de mejorar la resolución de un microscopio es elegir la iluminación adecuada.

La resolución es lo que nos permite ver dos puntos cercanos en una imagen por separado y no en una misma mancha, por ejemplo vamos en la ruta y vemos venir un automóvil a lo lejos con sus luces encendidas, al principio solo vemos una luz, a medida que se acerca llega un punto que distinguimos ambos faros, ese es el límite de resolución de nuestra vista en esas condiciones. Con el microscopio ocurre lo mismo, hay tres factores que intervienen en la resolución de un microscopio, la calidad del objetivo es una, la refracción de la muestra que se mejora notablemente empleando aceite de inmersión y la longitud de onda de la luz  de iluminación, cuanto mas corta sea mayor será la resolución, sabemos que en el espectro visible, el rojo es la onda mas larga y el violeta la mas corta, por tanto si iluminamos con una lámpara rica en rojos, la resolución será mas pobre que si iluminamos con una luz azul.

Como ilustración he conseguido los espectros de la luz solar, la luz blanca de led y la luz halógena

 

todos

Imagen tomada de:

http://www.hondask.es/foro/showthread.php?2404-xenon-rosa/page2 

Como puede apreciarse la luz de Led tiene una buena componente de luz azul, no así la luz de halógeno, la que además, tiene un consumo considerable y una buena porción de infrarrojos que aumentan la temperatura, en verano se hace notar esta particularidad

La reforma de mi microscopio LOMO, este microscopio es muy antiguo tiene mas de 30 años y además tiene una buena campaña de uso, originalmente traía una lámpara de 25W que se conectaba directamente a 220v sin transformador, lo que a mi gusto lo hacía peligroso (electrocución) y la iluminación era de tono amarillento, traía un concentrador hecho con una lente convergente. 

resolucion 006 []

resolucion 007 []

Se puede ver a simple vista el amarillo de la luz

resolucion []

Con una linterna de leds, para el trabajo utilicé una igual que esta, pero de color azul

resolucion 002 []

En aluminio tornee una pieza que encaja justo en la base del microscopio

resolucion 003 []

En la parte superior encaja la linterna a la que le he cortado una parte

resolucion 008 []

Acá puede verse la luz bien blanca.

 resolucion 009 []

El pobre microscopio esta bastante castigado, lleva 30 años ininterrumpidos de trabajo

La fuente, para no estar alimentando con pilas, construí una sencilla fuente que suministra 3v a 2 A regulados

resolucion 004 []

resolucion 005 []

El diagrama de la fuente es básicamente el de este página, el tansformador que usé es de 6v 2A. Y el transistor final en lugar del 2n3055 usé otro que tenía.

http://www.proyectopic.com.ar/circuitos_e/fuente/Fuentereg.htm

fuente

No hay que pensar que este cambio en la iluminación va a producir un cambio sustancial en la calidad, sin embargo si puedo asegurar que hay mejor nitidez que con la luz original.

Mejorando las prestaciones del microscopio óptico (2da parte)

 

Iluminando desde arriba

Tomando la idea de un participante del foro de cientificosaficionados, el amigo joliva68 he construido un anillo con cuatro leds de alto brillo blanco, obteniendo baste buen resultado para observación de insectos y ácaros, solo he podido usarlo con la lente panorámica de 10X

clip_image002

Imagen de un bebé pulgón

clip_image004

Para mejorar la profundidad siempre se pueden tomar varias fotos y con algún software hacer un apilamiento

Florescencia

Con un sencillo dispositivo se puede ver fluorescencia en muestras

Siempre tuve la idea de iluminar con luz UV, hoy en día es muy fácil conseguir LED cuya longitud de onda anda por los 395 nm, se pueden comprar por ebay por minedas, estos leds tienen una buena componente en visible alrededor de los 415 nm.

Siguiendo con la misma idea del dispositivo anterior construí un anillo con ocho leds de este tipo, creo que la iluminación sería mas conveniente desde abajo pero no estoy seguro si esa luz pueda dañar la vista, también se podría usar con campo oscuro y de esa forma se evitaría la incidencia directa sobre los ojos.

clip_image006

clip_image008

Para mejorar la intensidad de luz usé un espejo en láminas que obtuve cuando desarmé el display de un celular para sacar los plásticos polarizados, ese espejo colocado debajo la muestra aumenta notablemente la luminosidad, de cualquier forma siempre es conveniente apagar las luces del recinto donde se hace la observación.

clip_image010

Se ve mi cámara Canon A570 reflejada

Para poder ver algo necesitaremos pigmentos fluorescentes, se pueden comprar o bien obtener de los marcadores flúor que son bien económicos, se extrae del interior del marcador un filtro que tiene la tinta que necesitamos, para extraerla le largamos desde el extremo superior con una pipeta unos 10 cm3 de agua destilada o solución fisiológica estéril, en la foto puede verse el líquido obtenido.

clip_image012

clip_image014

Para preparar la muestra, por ejemplo de agua descompuesta donde hay muchos microorganismos, se ponen unas gotas de agua y la misma cantidad del liquido fluorescente, se deja aproximadamente una hora en contacto y luego el tubo se completa con agua y se centrifuga, se vierte el sobrenadante y se vuelve a lavar con agua, otra ves se vuelca el sobrenadante y con el sedimento se hace la observación entre porta y cubre

Se verán muchas bacterias que se tiñen fuertemente, algunas algas que absorben el colorante y microorganismos que también lo hacen.

clip_image016

clip_image018

Yo tengo muy poca tecnología para las imágenes, en vivo se ven muchas bacterias y microorganismos

Este video del que se ve muy poco ya que solo he podido usar la lente de menos aumento muestra uno de estos microorganismos con vivos movimientos

Mejorando las prestaciones del microscopio óptico (1ra parte)

Condensador de campo oscuro improvisado

Una de las formas de ver mejor cierto tipo de muestras es modificar la iluminación con que se incide sobre ella, el microscopio tiene una luz inferior que después de pasar por la muestra entra por el objetivo y después de algunas lentes llega al ojo, ese sistema hace que nosotros veamos un campo claro, ciertas muestras se ven mucho mejor con un campo oscuro, para tal fin hay un condensador llamado de campo oscuro que no deja pasar la luz que viene directamente, el dispositivo tiene una especie de mancha oscura en el centro y un anillo alrededor que permite pasar los rayos, esto hace que las muestras sean iluminadas por ases laterales de luz y dejan brillante su contorno que se realza mas con el fondo negro.

Estos condensadores de campo oscuro como el de la foto son bastante caros, alrededor de U$A 100, sin embargo hay un truco que nos permite simular el campo oscuro sin gastos y es lo que explicaré a continuación

En el condensador normal del microscopio generalmente hay un lugar donde van los filtros,

clip_image002

Condensador del microscopio

clip_image004

Puede verse el condensador con una lente convergente en la parte inferior e inmediatamente arriba el lugar de los filtros, en este caso es blanco pero puede ser azul también.

Se recorta en cartulina negra un circulo de tamaño bastante menor al filtro

clip_image006

Se pone en medio del filtro

clip_image008

Puede verse el parche colocado sobre el filtro

Los resultados

clip_image010

clip_image012

Son cristales cloruro de sodio (sal de mesa) vistos con iluminación normal y con el campo oscuro

clip_image014

clip_image016

Son las mismas imágenes con el mismo objetivo vistas con iluminación tradicional y fondo oscuro.

También es posible modificando el parche realizar iluminación oblicua que muchas veces también mejora la visión

Luz polarizada para el microscopio

Otra posibilidad que permite hermosa visión sobre todo de cristales es la observación de muestras con luz polarizada, para poder realizarla necesitaremos de dos filtros polarizadores, se pueden comprar a unos U$A 75 o se pueden obtener casi gratis como explicaré.

Estos filtros son como un film, la particularidad de ellos es que dejan pasar la luz solo en un plano, si colocamos un filtro en forma horizontal y otro en forma vertical la luz no pasará. Ahora si entre ambos filtros ponemos una muestra que sea capaz de desviar la luz podremos ver.

Bien como saben que soy el rey de los juntamugre no les dejaré comprar el filtro, lo obtendremos de material reciclado. De donde obtener los films, lo mas fácil es conseguir una tira del plástico que se usa para polarizar los vidrios de los autos, habrá que sacarle el pegamento y tratar de rayar lo menos posible.

Otra salida es conseguirse un par de lentes de 3D esos ya están sin adhesivo pero normalmente están bastante rayados, y la última que es la que hice yo, tomar los filtros de los displays LCD, estos traen pegado de adelante y de atrás un filtro de este tipo

clip_image018

Display de un movil

clip_image020

He separado el LCD

clip_image022

Despegado el film polarizado

clip_image024

Los filtros superpuestos uno polarización horizontal y el otro vertical, no dejan pasar la luz

clip_image026

Ambos filtros con la misma polarización

Como puede verse de acuerdo a la posición dejará pasar o no la luz.

Un filtro se colocará directamente sobre la luz del microscopio y el otro se puede usar directamente como si fuera el cubre de la muestra.

clip_image028

Para ajustar debemos girar el filtro que esta sobre la luz hasta tener el campo lo mas oscuro posible.

Los resultados

clip_image030

clip_image032

Este es un grano de arena visto con luz normal y polarizada

clip_image034

clip_image036

Granos de almidón de una papa

clip_image038

clip_image040

Estos son cristales de acido acetil salicilico de una aspirina

clip_image042

clip_image044

Granos de polvo

clip_image046

clip_image048

Fibras de tejidos de algodón, también las sintéticas se ven muy bonitas

Despertando al Rotífero Philodina

Con esto de buscar microorganismos resistentes, ando viendo en charcos, aguas podridas y demás lugares inhóspitos y hoy observando un bichito muy común del filo rotífero, (todo aquel que haya mirado en microscopio una gota de agua descompuesta los ha visto) se me ha ocurrido una idea, desecar la gota que los contenía y observar como se preparaban para los malos tiempos de sequía y luego que estén bien secos reanimarlos nuevamente.

Vi una escena en vivo y en directo de como se activan nuevamente que es una belleza, los animo a que hagan esta prueba porque no van a arrepentirse y es muy sencilla, además con cualquier microscopio por mas ordinario que sea puede verse, se usa aumento X 10 porque son bastante grandes.

La siguiente foto es del bicho del que les hablo, tienen una especie de rueda ciliada que gira en la cabeza, por eso lo de rotífero.

 

 

rotifero_brachionus

Esta foto fue tomada de http://www.sc2-esp.com/showthread.php?t=1105&page=4

Agrego un video de los rotiferos en acción vistos con campo oscuro, es una herramienta fantastica para el microscopio óptico que hace que la luz pase cruzada por la muestra y no entre en el objetivo esto hace que se vea la muestra con fondo negro y los contornos iluminados

fondooscuro 001 (Medium)

El video

Para reproducir este experimento es muy simple, se busca agua descompuesta de algún florero que lleve varios días ahí y con el microscopio en aumento 10X (el de menos aumento) se busca el microorganismo, es muy activo y bastante grande, con cualquier microscopio por mas elemental que sea pueden identificarlos,  puede verse la rueda de cilios que gira creando una corriente de agua  que le lleva el alimento al interior.

Una vez vemos el bicho dejamos que se seque la gota de agua sobre el porta, una o dos horas

Una vez seca tratamos de encontrar los quistes que se verán de esta manera

rotiferos 001 (Medium)

Luego que los hemos encontrado agregamos con suavidad una gota de agua sobre ellos y colocamos un cubreobjetos y comenzamos a observar la resucitación, mas o menos tarda unos 10 minutos en ponerse activo

Este video de producción propia muestra el espectáculo

Microorganismos extremotolerantes y extremófilos (Primera parte)

 

Introducción

Antes que nada dejar bien claro que esto es un trabajo “grueso” que nada tiene que ver con estudios que se hacen en universidades y centros de investigación en los que se cuenta con biología molecular donde todo es muy minucioso, la idea es con pocos medios tratar de investigar algo y llegar al menos a alguna conclusión válida.

Últimamente se ha oído hablar mucho de extremófilos y bichos casi inmortales capaces de sobrevivir a las condicionas mas adversas.

Este tema siempre me ha parecido por demás interesante al momento de evaluar de donde ha surgido la vida en nuestro planeta, sobre todo una de las hipótesis dice que la vida se habría iniciado por el choque de meteoritos o cometas que traían como polizones a bacterias, esto se llama panspermia.

Como para ilustrar un poco el tema vamos a definir que son los microorganismos extremófilos y extremotolerantes.

Extremófilo es el organismo que vive en condiciones extremas, es decir hace todas sus funciones en ese medio hostíl, aún reproducirse

Extremotolerante o extremoresistente: son los organismos que soportan condiciones extremas, pero no se replican en esos medios.

Hay bastante información sobre extremófilos en la red, me gustó este documento http://axxon.com.ar/zap/210/c-Zapping0210.htm

Agradecimientos:

A Petersen, Bencine, Crazy-Xaby de los foros de cientificosaficionados.com, también a mi querido amigo Ángel (Black Tiger) que siempre esta incentivando y aportando ideas en cualquier proyecto en el que me embarque.

De que trata este trabajo

La idea es investigar si en el suelo, en tierra común del jardín hay bacterias que puedan soportar agresiones físicas y químicas que los incluyan dentro del grupo de los extremoresistentes o extremotolerantes, con solo eso podemos inferir la posibilidad cierta de la panspermia, de la que hablamos antes y a su vez preguntarnos si estas bacterias, si las encontramos, en un gradiente de condiciones de la mejor a la peor no pueden haber ido adaptándose, mutando, para llegar a cumplir todas sus funciones muy cerca de las peores condiciones ambientales transformandose en extremófilos.

Muchos de los extremófilos descubiertos pertenecen al dominio archaea, es una división bastante nueva, antiguamente se dividía a los seres vivos en procariotas y eucariotas, hoy en día hay tres dominios, archaea, bacteria, y eucariotas, también hay extremófilos que son bacteria.

Las pruebas

– El material usado es tierra, se usó una que estaba guardada de hace mas de dos años en un recipiente plástico y proviene de un lote de siembra, una tierra bastante castigada con herbicidas y pesticidas y por supuesto muy baja humedad por el largo período de almacenamiento.

clip_image002

La tierra estaba almacenada en una bolsa a su vez dentro de un recipiente plástico por mas de 2 años

Primera prueba someter a vacío 10^-7 torr varias muestras durante 1 hora, si bien el vacío espacial es de mas de 10^-14 torr, el vacío proporcionado por una bomba difusora es alto vacío y ya hemos visto que pasa si algún eucariota se encuentra en esa condición,

a los muy pocos segundos muere, por desecación (el agua hierve a temperatura ambiente) además baja la temperatura del cuerpo y al encontrarse sin oxigeno entra en hipoxia Ver diez experimentos con vacío https://anajesusa.wordpress.com/2010/10/29/diez-experimentos-con-vacio/

clip_image004

Los frascos contienen aproximadamente 1 gramo de tierra cada uno

clip_image006

Las muestras en campana de vacío a 10^-7 torr (vacío de bomba difusora)

Una muestra va a frasco de hemocultivo, se usó por disponibilidad, pero son caros asi que para pruebas sucesivas se trabajó con caldo tripteína soya

Y otra a frasco con solución fisiológica estéril

clip_image008

Las muestras con numeración en negro son testigos, no fueron puestas al vacío

clip_image010

Resultado positivo en los frascos con cultivo para bacterias y negativo en los otros dos frascos donde se busco algas y unicelulares (Parece que estos bichitos y vegetales perecieron por desecación de la tierra durante estos años que estuvo almacenada) Aún sigue la observación periódica

clip_image012

El frasco con medio para hemocultivo con abundante espuma

clip_image014

También el frasco con la muestra sometida a vacío presenta abundante espuma y turbidez

En los frascos con solución fisiológica estéril después de 40 días aparecen pequeños unicelulares flagelados en la muestra que no se sometió a vacío, la otra muestra no presenta ninguna actividad

– Segunda prueba someter a vacío 10^-7 torr a una muestra de la misma tierra durante 11 días.

clip_image016

La ampolla al vacío donde estuvo la muestra de tierra por espacio de 11 días

Resultado positivo para bacterias en medio líquido, caldo tripteína soya. El desarrollo tanto en esta prueba como en la anterior corresponde a bacilos gram positivos, esporulados, móviles, productores de gas (no combustible, posiblemente CO2) con gran velocidad de replica, en unas 6 horas enturbian el medio, por pruebas simples realizadas no parecen modificar el pH del medio.

clip_image018

El aspecto de los bacilos gram positivos con espora central (color verde) tinción verde de malaquita

– Tercera prueba someter a temperatura de 65º a una muestra de tierra abonada de jardín con buena humedad y a hisopo con muestra proveniente de un repique de los bacilos que sobrevivieron a la prueba de vacío. Se dejo en la estufa a esa temperatura 24 horas.

Resultado positivo en ambos frascos con caldo tripteína Soya.

clip_image020

El recinto termostatizado y el multímetro con el termopar indicando la temperatura

– Cuarta prueba igual a la anterior, pero a temperatura de 85º

clip_image022

Hubo que cambiar el recinto termostatizado por uno de madera ya que el que se usó en la otra prueba era plástico y se ablandaba a 85º

Resultado, positivo en caldo tripteina soya, parece que son extremadamente resistentes al calor seco, la coloración indica gram positivos, con espora central, prueba de la catalasa positiva, parece ser que son del genero Bacillus, son móviles por lo que se descartaría bacillus antrasis (puff…. Menos mal!!!)

– Quinta prueba, se somete una muestra de la tierra de las de la primera prueba a autoclave, en realidad una olla a presión, durante 15 minutos, se verificó la temperatura dentro del recinto de esterilización 118ºC.

Resultados: siguen desarrollando en medio líquido tripteína soya, parece ser la misma bacteria, también se procedió a resembrar en placa de agar nutritivo en anaerobiosis, hasta ahora todo se había hecho en aerobiosis, el resultado fue positivo, parece que les importa poco si tienen o no oxígeno, pueden ser anaerobios facultativos

-Sexta prueba: se somete a radiación alfa un cultivo de agar nutritivo inoculado con la bacteria.

Resultado: las bacterias son sensibles a la radiación alfa proveniente del americio, material radiactivo fuerte emisor de este tipo de partículas, se evalúa la posibilidad que en el sitio de inhibición de desarrollo las esporas sigan viables, este experimento esta en curso

clip_image024

Placa de americio

clip_image026

En agar nutritivo desarrolla en toda la superficie salvo el lugar expuesto a partículas alfa

clip_image028

En esta imagen puede verse el efecto de la radiación

Continuará….